操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時內檢測完畢。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:石英比色皿(751、721、722等)
規格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
間氟-DL-酪氨酸 m-Fluoro-DL-tyrosine 403-90-7 質量規格:0.99 體液二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
鈣蛋白酶抑制劑I(進口) Calpain Inhibitor I(ALLN) 110044-82-1 質量規格:≥95%,美國進口 細胞二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
DL-丙氨酰-DL-丙氨酸 DL-Ala-DL-Ala 2867-20-1 質量規格:0.97 組織二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
DL-丙氨酰-DL-正纈氨酸 DL-Alanyl-DL-norvaline 2325-18-0 質量規格:0.99 血液二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
3-(1-萘基)-L-丙氨酸 3-(1-Naphthyl)-L-alanine 55516-54-6 質量規格:>98%,BR 體液二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
Fmoc-3-(2-萘基)-D-丙氨酸 Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine 138774-94-4 質量規格:0.98 細胞多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
L-瓜氨酸 L-Citrulline 372-75-8 質量規格:>99%,BR 組織多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
Fmoc-L-瓜氨酸 Fmoc-L-Citrulline 133174-15-9 質量規格:>98%,BR 血液多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
Boc-L-β-高丙氨酸 Boc-L-β-homoalanine 158851-30-0 質量規格:>98%,BR 體液多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
Boc-L-beta-谷氨酸5-芐酯 Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl ester 254101-10-5 質量規格:0.98 植物多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯 Fmoc-β-homoaspartic acid 209252-17-5 質量規格:>98%,BR 純化線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯 Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester 203854-49-3 質量規格:0.98 細胞線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
高精氨酸 H-HomoArg-OH 156-86-5 質量規格:98%,BR,L型 組織線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
L-羥基脯氨酸(標準品) L-Hydroxyproline 51-35-4 質量規格:HPLC≥98%,標準品 細胞NADPH氧化酶活性化學發光法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次(10樣本)
石英比色皿(751、721、722等)人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)elISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人過氧化氫酶(CAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人過敏/補體片斷4(C4a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人廣譜細胞角蛋白(P-CK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝