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提取質粒DNA及瓊脂糖凝膠電泳檢測實驗方法原理
日期:2022-01-08 21:51
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摘要:
堿變性法提取質粒DNA:
Xi菌培養物加入SDS和NaOH堿性溶液處理后,菌體裂解,可使Xi菌的質粒DNA、染色體DNA和RNA一起從細胞內釋放出來,經瓊脂糖凝膠電泳,因各種核酸分子的遷移率不同將上述核酸分成不同的帶。用溴化乙錠(EB)染色后,在紫外線燈下可看到各種核酸帶發出的熒光。根據熒光的位置,可區分不同的核酸帶。
瓊脂糖凝膠電泳:
瓊脂糖凝膠電泳技術(Agarosegelelectroghoresis)是分離、鑒定和提純DNA片斷的有效方法。凝膠分辨率決定于使用材料的濃度,并由此決定凝膠的孔徑。瓊脂糖凝膠可分辯0...
堿變性法提取質粒DNA:
Xi菌培養物加入SDS和NaOH堿性溶液處理后,菌體裂解,可使Xi菌的質粒DNA、染色體DNA和RNA一起從細胞內釋放出來,經瓊脂糖凝膠電泳,因各種核酸分子的遷移率不同將上述核酸分成不同的帶。用溴化乙錠(EB)染色后,在紫外線燈下可看到各種核酸帶發出的熒光。根據熒光的位置,可區分不同的核酸帶。
瓊脂糖凝膠電泳:
瓊脂糖凝膠電泳技術(Agarosegelelectroghoresis)是分離、鑒定和提純DNA片斷的有效方法。凝膠分辨率決定于使用材料的濃度,并由此決定凝膠的孔徑。瓊脂糖凝膠可分辯0.1——6.0kb的雙鏈DNA片段。瓊脂糖凝膠電泳是一個電場作用。它首先利用瓊脂糖的分子篩效應,此外,在弱堿性條件下,DNA分子帶負電荷,從負極向正極移動。根據DNA分子大小、結構及所帶電荷的不同,它們以不同的速率通過介質運動而相互分離。借助溴化乙錠(EB)能與雙鏈DNA結合的作用,利用EB染色,并通過紫外線激發即可觀察被分離DNA片段的位置。
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